蛇伤早期快速诊断法

目前应用较广的并方便基层应用的蛇伤蛇种早期快速诊断法为 天然胶乳凝集抑制法 ，具有方法简便、特异性强、迅速、准确率高等优点。整个操作过程只需10分钟左右就能准确诊断出为何种毒蛇咬伤，阳性率达98％以上，为抗蛇毒血清的正确应用带来曙光。 一、 天然胶乳凝集抑制法 原理 用天然胶乳(聚异戊二烯)吸附蛇毒，制成蛇毒天然胶乳抗原，此蛇毒天然胶乳抗原可以和相应的特异性蛇毒抗体发生反应，使胶乳凝集，称为胶乳凝集反应。蛇伤早期患者咬伤局部含有残留蛇毒，若加入相应的蛇毒致敏过的胶乳抗原，胶乳不发生凝集，即为胶乳凝集抑制试验阳性。反之，如果吸出液中无蛇毒或无相应的蛇毒存在时，则胶乳发生凝集为阴性，以此来诊断确定致伤蛇种。 二、使用方法 ①先用生理盐水(忌用乙醇、碘酒等)把伤口皮肤冲洗干净，再用消毒刀片或注射针头在伤口上(以牙痕为中心)轻轻划痕(以微出血即可)。如果伤后伤口未闭合者，从牙痕处挤出少许渗出液即可。然后用吸管从伤口上吸取渗出液，以3～5倍之乍理盐水稀释。 ②取清洁玻片一块，用红铅笔画成若干格，各格标明不同蛇种名称，将吸出液滴入各格内，每格1滴(约50uL)。 ③再分别加入该地区常见的或估计的蛇种诊断I液1滴至相应格内，混合摇动1分钟。 ④各格再加入相应的蛇种诊断Ⅱ液l滴，混合摇动5～8分钟。 ⑤观察结果：凝集者为阴性，表明吸出液中无该种蛇毒。呈均匀混浊不凝集者为阳性，表明为该种蛇致伤。 三、晚期患者的致伤蛇种诊断 晚期患者的血清用盐水稀释5倍作为检材，检查方法基本同卜。将稀释后的血清l滴分别与各种蛇伤诊断Ⅱ液1滴混合，摇动10分钟后观察结果，凝集者为阳性，不凝集者为阴性。 该法快速诊断的时间愈早，准确率愈高。时间长、伤口已无蛇毒时，则阳性率低。一般伤后12小时内阳性率可达99％，24小时左右阳性率降至93~／／00，时间愈长，阳性率愈差。 五、注意事项 ①该检查液有效期一般为1年，必须4~C～10℃冰箱保存。 ②伤口吸出液必须是在伤口未经任何破坏和药物处理之前，如有碘酒、药渣等药水涂抹过伤口，应用生理盐水冲洗后再取吸出液。否则影响检测结果。挤出的液体可适当按1：5稀释后再用于检查。 ③玻片必须清洁 I液和Ⅱ液必须同一批号，不可混批使用。 ④胶乳如出现自凝，有凝结块，或I液出现混浊，或同批号的T液和Ⅱ液反应不出现凝集时，为诊断液失效，不可使用。 ⑤有可能出现假阴性，如早期蛇毒含量过大(特别是眼镜蛇、眼镜王蛇等)可造成胶乳白凝。在病史及局部和全身症状是典型的毒蛇咬伤的情况下，应重新再做一次诊断。这时应将吸出液进一步稀释后再做． ⑥生半夏叶试验：取生半夏叶置嘴中咀嚼，无麻辣味甚至感觉甜味者为毒蛇咬伤。(不得吞下)。 图2 2毒蛇牙痕(左)与无毒蛇牙痕(右)