内蒙古阿荣旗测土配方施肥项目农化样有效磷检测技术方案

    土壤有效磷，Available phosphorous,缩写为A-P，也称为速效磷，是土壤中可被植物吸收的磷组分。土壤中有效磷含量状态指能被当季作物吸收的磷量。了解土壤中有效磷的供应状况，对于施肥有着直接的意义。在有效磷的测定上，生物方法测定被认为是土壤有效磷含最可靠的，土壤有效磷含量测定值是测土配方施肥中一个重要的技术指标。2002年全国耕地地力调查显示，阿荣旗土壤基本为中性偏酸，采用碳酸氢钠提取-钼锑抗比色法测定（Olsen法）土壤有效磷含量是目前测土配方施肥采用的普遍方法，也是被确定的现行的国家标准（GB12297-90），比较符合阿荣旗耕地土壤状况。
1田间取样及样品制备
按计划取土数量，土壤化冻30cm以上，春播施肥前，在土壤1-25cm耕层取样，搅拌混匀，经缩分，留1kg装袋，取后30天自然风干。用2mm尼龙孔径筛过筛处理风干试样，装入牛皮纸袋，按编号顺序上架存放，待测。
2土壤中有效磷的测定方法
2.1原理
碳酸氢钠溶液除可提取水溶性磷外，也可抑制Ca2+的活性，使一定量活性较大的Ca-P盐类中的磷被浸出，也可使一定量活性Fe-P和Al-P盐类中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀。浸提液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。土壤浸出的磷量与土液比、液温、震荡时间及方式有关。本法严格规定土液比为1:20，浸提液温度为25℃±1℃，震荡提取时间为30min。
2.2主要仪器设备
T6紫外-可见分光光度计
恒温（25℃±1℃）往复式震荡机，满足180r/min±20 r/min的震荡频率。
PH计、200ml塑料瓶、125ml高脚杯、无磷滤纸
2.3试剂
2.3.1无磷活性炭粉
2.3.2氢氧化钠溶液〔ρ（NaOH）=100g?L-1〕:称取10g氢氧化钠溶于100ml纯水中
2.3.3碳酸氢钠浸提剂：〔ρ（NaHCO3）=0.5mol?L-1，PH=8.5〕称取42.0g碳酸氢钠（NaHCO3）溶于约950ml纯水中，用100g?L-1氢氧化钠溶液调节PH至8.5，用纯水稀释至1L。储存于聚乙烯桶（25kg装）或玻璃瓶中备用。如储存期超过20d，使用时需重新校正PH。
2.3.4酒石酸锑钾溶液〔ρ（K（SdO）C4H4O6?1/2H2O）=3g?L-1〕：称取0.3g酒石酸锑钾（化学纯）溶于纯水中用纯水稀释至100ml。
2.3.5钼锑储备液：称取10.0g钼酸铵〔（NH4）6MO7O24?4H2O〕溶于300ml约60℃纯水中，冷却。另取181ml浓硫酸缓缓注入800ml纯水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100ml3g?L-1酒石酸锑钾溶液，最后用纯水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用。
2.3.6钼锑抗显色剂：称取0.5g抗坏血酸（C6H8O6左旋，旋光度+21-22o）溶于100ml钼锑储备液中。此溶液现用现配。
2.3.7磷标准储备液〔ρ(P)=100ug?ml-1〕:称取经105℃下烘干2h的磷酸二氢钾（优级纯）0.4390g，用纯水溶解后，加入5ml浓硫酸，然后加纯水定容至1000ml。该溶液放入冰箱可长期使用。
2.3.8磷标准溶液〔ρ(P)=5ug?ml-1〕：吸取5.00ml磷标准储备液于100ml容量瓶中，定容。该溶液现用现配。
2.4分析步骤
2.4.1称取通过2mm孔径筛的风干试样2.50g，置于200ml塑料瓶中，加入1g无磷活性炭，加入25℃±1℃的碳酸氢钠浸提剂50.0ml，摇匀，在25℃±1℃温度下，于振荡器上用180r/min±20 r/min的震荡频率，震荡30±1min，立即用无磷滤纸过滤于干燥的125ml高脚杯中。吸取滤液10.00ml于50ml容量瓶中，加入显色剂5.00ml，慢慢摇动，排出CO2后加纯水定容至刻度，充分摇匀。在室温高于20℃处放置30min，用空白溶液（10.00ml碳酸氢钠浸提剂代替土壤浸提液，同上处理）为参比，用1cm光径比色皿在波长700nm出比色，测量吸光度。
2.4.2标准曲线绘制：吸磷标准溶液〔ρ(P)=5ug?ml-1〕0,1.00,2.00.，3.00,4.00,5.00,6.00ml于50ml容量瓶中，加入浸提剂10.00ml，显色剂5ml，慢慢摇动，排出CO2后加纯水定容至刻度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0.00,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50,0.60 ug?ml-1。在室温高于20℃处放置30min后，按上述样品待测液分析步骤、条件进行比色，测量吸光度，绘制标准曲线或计算回归方程。
2.4.3结果计算
有效磷（P）mg/kg=〔ρ(P)?V?D〕/m
式中：
ρ(P)—查标准曲线或回归方程而得到测定液中P的质量浓度，ug?ml-1；
V—显色液体积，50ml；
D—分取倍数，即试样提取液体积/显色时分取体积，本试验为50/10；
m—风干试样质量，g。
平行测定结果以算术平均值表示，保留小数点后一位。
精密度
平行测定结果的允许误差
测定值（P，mg/kg）              允许差（P，mg/kg）
<10                         绝对差值≤0.5
10-20                       绝对差值≤1.0
>20                        相对相差<5%
注释
1）测定时也可采用于波长880nm处比色，浸提时可不加活性炭退色。
2）如果土壤有效磷含量较高，应减少浸提液的吸样量，并加浸提剂补足至10.00ml后退色，以保持显色时溶液的酸度。计算时按所取浸提液的分取倍数计算。
3）用NaHCO3溶液浸提有效磷时，温度影响较大，应严格控制浸提温度。
2.5质量控制
药品 无磷活性炭使用脱磷活性炭，
称量 天平使用前需校准、预热。称取试剂、试样要精准。
仪器T6S紫外-可见分光光度计预热并校准。比色皿清洗干净。
玻璃、塑料器皿刷洗干净。
分批测定，每10个样品带1个平行样，每批带一个GBASA-la为参比样。按平行测定结果和参比样要求的允许误差范围要求，达到要求为合格，否则重做。
2.6原始记录填写完整无涂改。
2.7注意事项：安全用电，三费达标排放。