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猪常用血清的制备方法和流程

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一、 血清制备流程及说明
1、 动物:长白,30头,免疫前对猪体进行健康性检测,其中病毒性检测采用ELISA法,细菌性检测采用玻片凝集试验。其中样品为血样、抗原为以上列表中的疫苗抗原,阴性对照为SPF猪血清。
2、 免疫方法:使用以上列表中的部分疫苗为免疫原,并按相应说明每周免疫1次,连续4次,最后1次10天后放血。
3、 放血及效价测定:采用颈动脉无菌放血,3000rpm离心收集血清。经ELISA及玻片凝集试验检测,30头猪的抗病毒效价(ELISA)为1:16-1:64,抗细菌的效价为1:8-1:32。阴性对照为SPF猪血清。
4、 血清的灭毒及灭菌:为防止血清中有残留的疫苗弱毒及细菌,采用血清巴氏消毒法,将血清进行55度1小时灭毒灭菌。
5、 血清的分装:采用无菌分装,分装于7毫升干烤灭菌的管制瓶中,加盖无菌胶塞并压铝盖封口,迅速放置于-80度超低温冰柜进行速冻保存。
6、 取健康大猪(75公斤左右)及小猪各一头,分别注射5倍剂量(大猪50毫升,小猪25毫升)的高免血清进行动物安全性实验.
血清制备过程中使用的疫苗清单及生产厂家
品    名 产    地 规    格 数    量 使用方法
   猪瘟活疫苗 哈药集团黑龙江省生物制品一厂 50头份/瓶 6/瓶 皮下注射
   猪丹毒疫苗 同上 50头份/瓶 6/瓶 皮下注射
   猪多杀性巴氏杆菌活疫苗(猪肺疫) 同上 50头份/瓶 6/瓶 口    服
   仔猪副伤寒活疫苗 同上 30头份/瓶 6/瓶 皮下注射
   猪败血性链球菌活疫苗 同上 20头份/瓶 12/瓶 皮下注射
   繁殖与呼吸障碍综合症-猪细小病毒-猪伪狂犬三联灭活苗 辽宁省益康生物制品厂 5头份/瓶 10/瓶 肌    注
   圆环病毒-蓝耳病二联蜂胶灭活苗 青岛恒康生物科技有限公司 20头份/瓶 10/瓶 肌    注
猪口蹄疫O型灭活疫苗 中牧实业股份有限公司兰州生物制品厂 50头份/瓶 10/瓶 肌    注
仔猪腹泻基因工程K88K99 987P.F41四价灭活疫苗 中国科学院上海生物工程研究中心 1头份/支 8支 皮下注射
   仔猪水肿、出血性肠炎二联疫苗 吉林省高新技术研发中心研制 5头份/瓶 10/瓶 肌    注




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