先用脱脂棉制作接种用的棉球，大约每克脱脂棉做10个棉球，其大小可根据鸡的泄殖腔大小适当改变，并尽量均匀一致，其制作方法与制作医用酒精棉球相同，将制作好的棉球按500个一份分别放置到适当的容器中。再将3倍于说明量的疫苗按照下述方法稀释：先称1克脱脂棉，让其吸饱水后称重，计算出它的吸水量，1份（500个）棉球的重量×1克棉球的吸水量=1份棉球所需的疫苗稀释量（大约每克脱脂棉吸水10毫升）。取每500只鸡所需的疫苗（2000羽份）稀释至1份棉球所需量后倒入盛放棉球的容器中，让脱脂棉球都吸足稀释液而容器中没有多余的稀释液。
操作时由两人进行，一人抱鸡并用手将其尾羽向上掀起，使肛门暴露，另一人用镊子夹取一个棉球塞入鸡的泄殖腔中并旋转晃动棉球，均匀涂抹鸡的泄殖腔四壁，让棉球暂留于泄殖腔中，待鸡排便时可自动带出。
