1 材料与方法 ?
1.1 材料?
1.1.1 供试药品 10%氟甲喹可溶性粉(原料由仙居捷大医药化工有限公司提供，批号为20010628)，5%诺氟沙星可溶性粉(原料由新昌永兴化工厂提供，批号为20010706)均由安吉丰牧兽药有限公司生产?。?
1.1.2 试验动物 1日龄艾维茵肉鸡购自浙江大学正大肉鸡发展中心，在严格消毒条件下饲养至14日龄供试。?
1.1.3 供试菌种 鸡源性大肠杆菌标准菌种(O78)购自中国兽医药品监察所。?
1.1.4 饲料 为不含任何抗菌药物的雏鸡饲料，由杭州田野生态养殖公司提供。?
1.2 方法?
1.2.1 菌种 将冻干菌加入肉汤溶解，接种于琼脂平皿上，置37℃培养18 h，挑选典型菌落于肉汤中培养18 h取出，用倾注平板稀释法计数。?
1.2.2 体外抑菌试验 (1)最低抑菌浓度(MIC)测定 取15支加塞灭菌试管，分别将供试药品稀释后，每管加入10-3倍稀释的菌液0.2 ml(第15管为不加细菌对照管)，37℃培养18 h，判定药物对该菌的MIC值。
(2)药敏试验 采用纸片法进行，测定药物为10%氟甲喹、5%诺氟沙星，药敏纸
片含药量为10 μg/片，按常规自制。?
1.2.3 预备试验 取50羽雏鸡，随机分成5组，分别经胸肌注射不同剂量的试验菌液，观察发病和死亡情况，以确定正式试验时细菌的接种量。?
1.2.4 正式试验 挑选体重基本均匀一致的14日龄健康鸡，随机分成6个处理组，每组30羽，详见表1。根据预备试验结果，除阴性对照组外，每组鸡经胸肌注射试验菌液。接种菌液后，按设定的药物浓度立即分别饮水给药，连续用药5天，所用药液现配现用。攻毒后仔细观察和记录各组鸡的发病情况、临床症状及死亡情况，对死亡鸡进行剖检，取肝、心血、脾
进行细菌学分离培养鉴定，确定鸡只死亡是否由接种菌感染致死，临床观察时间为10天。于接种细菌前和试验结束时分别称量各组鸡的体重，计算相对增重率。
表1 试验鸡分组给药情况?
组别 羽数 药物 剂量(mg/kg) 接种菌量 给药方法
1组(低剂量组) 30 氟甲喹 3 胸肌注射0.5 ml?
2组(中剂量组) 30 氟甲喹 6 胸肌注射0.5 ml?
3组(高剂量组) 30 氟甲喹 9 胸肌注射0.5 ml?
4组(药物对照组) 30 诺氟沙星 10 ? 胸肌注射0.5 ml?
5组(阳性对照组) 30 不给药 不给药 ? 胸肌注射0.5 ml?
6组(阴性对照组) 30 不给药 不给药 不接种
饮水给药，每日两次，连用5天，氟甲喹首次用量加倍
1.2.5 药效评价 根据各试验组鸡的发病情况、临床症状、死亡情况、相对增重率、最低抑菌浓度和药敏试验结果，并经统计与分析，评价氟甲喹可溶性粉对大肠杆菌病的临床疗效。?
2 结果 ?
2.1 体外试验?
2.1.1 细菌计数 该试验菌液浓度为每毫升含大肠杆菌72亿个。?
2.1.2 MIC测定 氟甲喹对大肠杆菌O??78?的MIC为0.78 μg/ml；诺氟沙星对鸡大肠杆菌的MIC为?0.099 μg/ml?，结果表明氟甲喹对鸡源大肠杆菌O??78?生长有较强的抑制作用。?
2.1.3 药敏试验 氟甲喹平均抑菌圈直径为28.5±1.1 mm；诺氟沙星的抑菌圈 直径为32.2±?1.5 mm?。结果表明鸡源大肠杆菌O78对氟甲喹与诺氟沙星均敏感。?
2.2 体内试验?
2.2.1 预备试验结果 根据预试确定雏鸡胸肌注射菌液的最佳剂量为0.5 ml(含菌为72亿个/ml)，可诱发大肠杆菌病。据此进行正式试验。?
2.2.2 临床观察 各试验组接种菌液后4～5 h，部分鸡开始出现不同程度的临床症状，主要表现为减食、精神委顿、打堆；9 h后所有的鸡发病，表现为精神委顿、缩颈闭眼，饮食欲明显下降，排稀白色水便。给药组第2天发病率下降，发病症状减轻，第4天症状全部消失；死亡情况：给药组中攻毒后第2天第1组有3只鸡死亡，第3组有1只鸡死亡，攻毒后第3天第4组有1只鸡死亡。阳性对照组发病症状出现时间比给药组提前半小时，表现出的症状较严重，发病率为100%，部分鸡到试验结束时仍未康复；死亡情况：攻毒后第2天发现有9只鸡死亡，其后陆续有鸡死亡，到第7天共死亡16只。?
2.2.3 剖检特征 腿内侧肌肉出血；心脏冠状沟出血，心包有纤维素性渗出液；气管内有黏液，气管黏膜出血，胸腹气囊混浊，散布有脓性斑点；肝脏肿大有坏死点；脾肿大并有坏死斑；肾脏苍白且有针状出血点；小肠臌气，且内容物稀薄；腺胃黏膜坏死脱落；肠系膜充出血。?
2.2.4 细菌学检验结果 从病死鸡的肝、心血、脾中均分离到菌落形态均匀一致的细菌，经鉴定为大肠杆菌。?
2.2.5 药物治疗结果 见表2。
表2 药物对雏鸡大肠杆菌病的疗效 ?
组别 给药剂量 死亡率(%) 保护率(%) 相对增重率(%)
1 氟甲喹3 mg/kg体重 10.00 90.00 93.19
2 氟甲喹6 mg/kg体重 0.00 100.00 93.15
3 氟甲喹9 mg/kg体重 3.33 96.67 90.57
4 诺氟沙星10 mg/kg体重 3.33 96.67 98.65
5 阳性对照组 53.33 46.67? 65.25
6 阴性对照组 0.00 10.00? 100.00
* 指存活率
经统计分析，阳性对照组的死亡率极显著高于各给药组(P＜0.01)；各给药组的保护率极显著高于阳性对照组(P＜0.01)。各给药组间的死亡率差异不显著(P＞0.05)，表明不同给药剂量的氟甲喹对雏鸡大肠杆菌病均有显著的疗效；从相对增重率可以看出，阳性对照组明显低于各给药组，而各给药组的相对增重率与阴性对照组接近。?
3 讨论 ?
3.1 体外抑菌试验表明，氟甲喹对鸡大肠杆菌有较强的抑菌作用，抑菌圈直径为28.5±1.1mm，属高敏，MIC为0.781 μg/ml，治疗试验保护率均在90%以上。采用饮水给药比混料方便，鸡只发病时往往引起采食量下降，但饮水量下降不明显，因而能保证鸡体内一定的有效药物浓度，达到较好的疗效。?
3.2 统计学分析表明，氟甲喹与诺氟沙星组的死亡率均极显著低于阳性对照组(P＜0.01)；保护率极显著高于阳性对照组(P＜0.01)。氟甲喹各剂量组及诺氟沙星组之间差异不显著(P＞0.05)，但以氟甲喹中剂量组(6 mg/kg体重)疗效较佳，其保护率为100%。?
3.3 从相对增重率看，各接种细菌组的相对增重率均低于阴性对照组，但各给药组的相对增重率明显高于阳性对照组；从临床症状看，各给药组发病迟(比阳性对照组延迟30 min)，表现症状较轻，表明氟甲喹能缓解临床发病症状，并能保持良好的增重速度?。?
综上所述，氟甲喹能有效控制鸡大肠杆菌感染，降低鸡只的发病率和死亡率，并在一定程度上减少了存活鸡的体重下降，采用饮水给药，使用方便，显示其在家禽的细菌性感染疾病防治方面有广阔的前景。?
